簡要描述:
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發揮重要作用。
更新時間:2024-09-03;廠商性質:經銷商;覽量:783
商品屬性:
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3210 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3210 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
YSH3210 | 25管/24樣 | 紫外分光光度法 |
商品詳情:
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒測定意義
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發揮重要作用。
測定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。
需自備的儀器和用品
分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到570 nm,蒸餾水調零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。
3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。
4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。
注意:空白管和標準管只需要測定一次。
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